• 产品品牌： REAGEN
• 产品货号： RN065FP
• 产品规格： 50/100T
• 产品适用： 对样本中流感病毒H5N1亚型RNA进行检测，适用于流感病毒H5N1型感染的辅助诊断及流行病学调查。
• 产地来源： 深圳
• 保质期： 12个月

【产品名称】

通用名称：流感病毒H5N1亚型核酸检测试剂盒(荧光PCR法)

【包装规格】

50人份/盒

【预期用途】

对样本中流感病毒H5N1亚型RNA进行检测，适用于流感病毒H5N1型感染的辅助诊断及流行病学调查。

【检验原理】

本试剂盒采用聚合酶链式反应（PCR）结合Taqman技术，对禽流感病毒H5N1亚型的特异性核酸片段进行荧光PCR检测。

【主要成分】

【储存条件及有效期】

试剂置于-30~-15℃避光保存，有效期为12个月。本产品反复冻融应不超过5次。

【适用仪器】

荧光定量PCR仪：ABI 7500荧光PCR仪.；ABI Quantstudio5 ；Gentier 96R；SLAN-96P全自动医用PCR分析系统。

【样本要求】

1. 适用样本

咽拭子：应使用专用采样拭子，适度拭抹咽后壁和两侧扁桃体部位；迅速将拭子放入标本采集管中，旋紧管盖并密封，以防干燥。                                      

全血：疑似感染动物的静脉血2mL至EDTA-2Na抗凝管，8000rpm离心2min，取适量上清液于1.5mL灭菌离心管中。

2. 样本运输和保存

上述标本短期内可保存于-20℃，长期保存可置-70℃，但不能超过6个月，标本运送应采用2~8℃冰袋运输，严禁反复冻融。

 【检验方法】

1. 样本处理

取待测样本200ul，按照核酸提取试剂盒说明书进行核酸提取。

2. 试剂配置（在准备区进行，与扩增区分开，冰上操作）

注：试剂使用前要完全解冻，使用前涡旋混匀，10000 rpm离心5 s，确保试剂完全离心至管底，否则会出现装量差异的现象。若有N个待检测样本，则需配置N+2扩增反应（待检样本数N+1个阳性质控品+1个阴性质控品），按下表要求进行扩增反应液的配制，配制完成后充分震荡混匀，10000 rpm离心5 s。按每管20μL分装至0.2 ml PCR管中，并做好标记，扩增反应液需现配现用。

3. 加样（在样品处理区进行，冰上操作）

按阴性质控品、待测样品、阳性质控品的加样顺序，分别取5μL，加入至已分装扩增反应液的八联管中，反应总体系为25μL。盖紧管盖，短暂离心后置于荧光定量PCR仪中，并记录样本摆放顺序。

4. 扩增反应（在扩增区进行）

选择FAM通道检测H5亚型，选择HEX通道检测N1亚型。按以下扩增程序表设置PCR扩增参数。

 5.质量控制

以上要求需在同一次实验中同时满足，否则，本次实验无效，需重新进行

6.结果判读

反应结束自动保存结果，根据分析后图像调节Baseline 的Start 值、End 值以及Threshold 值（可以根据实际情况自行调整，Start 值可以在3~15、End 值可设在5~20，调整阴性对照的扩增曲线平直或低于阈值线），点击Analysis 自动获得分析结果，在Report 界面观看结果。

试验结果判断

【检验结果的解释】

1．实验室环境污染，试剂污染，样品交叉污染会出现假阳性结果，如阴性对照检测为阳性，则需做进一步实验来确认是哪类污染。如为试剂污染，需开封新的试剂盒再次进行实验；如为样品交叉污染，应重复实验；如为实验室环境污染，需对实验室进行彻底清洁或更换实验室再进行实验。

2．试剂运输、保存或配制不当会引起试剂检测性能下降，出现假阴性结果。如阳性对照检测为阴性，应开封新的试剂盒再进行实验。

【检测方法的局限性】

1. 该试剂盒仅为定性产品，不做定量测定。

2. 当样本的病毒含量低于最低检出限时，可能会出现假阴性。阴性结果仅说明提取的核酸浓度低于该试剂盒的检测极限，但不能完全排除病毒感染的可能。

【产品性能指标】

1.准确性：企业阳性参考品检测结果全部为阳性，阳性率为15/15。

2.最低检测限：该试剂盒最低检测限为500copies/mL。