禽流感病毒H5N1核酸检测试剂盒(荧光PCR法)

对样本中流感病毒H5N1亚型RNA进行检测,适用于流感病毒H5N1型感染的辅助诊断及流行病学调查。

  • 产品品牌: REAGEN
  • 产品货号: RNS92049
  • 产品规格: 20T
  • 产品适用: 禽流感病毒H5N1的检测和判定
  • 产地来源: 深圳

【产品名称】

通用名称:禽流感病毒H5N1核酸检测试剂盒(荧光PCR)

【包装规格】

50人份/

【预期用途】

对样本中流感病毒H5N1亚型RNA进行检测,适用于流感病毒H5N1型感染的辅助诊断及流行病学调查。

【检验原理】

本试剂盒采用聚合酶链式反应(PCR)结合Taqman技术,对禽流感病毒H5N1亚型的特异性核酸片段进行荧光PCR检测。

【主要成分】

 

组分成分

50人份/

主要成分

规格

数量

 

 

PCR反应液

 

 

884μL /

 

1

引物、探针、脱氧核糖核苷三磷酸(dNTP)、缓冲体系

 

酶混合液

156μL /

1

Taq酶、MMLV

阳性对照

200μL /

1

含目的片段的质粒

阴性对照

500μL /

1

无核酸酶水

 【储存条件及有效期】

试剂置于-30~-15避光保存,有效期为12个月。本产品反复冻融应不超过5

【适用仪器】

荧光定量PCR仪:ABI 7500荧光PCR.ABI Quantstudio5 Gentier 96RSLAN-96P全自动医用PCR分析系统

【样本要求】

1. 适用样本

咽拭子:应使用专用采样拭子,适度拭抹咽后壁和两侧扁桃体部位;迅速将拭子放入标本采集管中,旋紧管盖并密封,以防干燥。                                      

全血:疑似感染动物的静脉血2mLEDTA-2Na抗凝管,8000rpm离心2min,取适量上清液于1.5mL灭菌离心管中。

2. 样本运输和保存

上述标本短期内可保存于-20℃,长期保存可置-70但不能超过6个月,标本运送应采用2~8℃冰袋运输,严禁反复冻融

 【检验方法】

  1. 样本处理

取待测样本200ul,按照核酸提取试剂盒说明书进行核酸提取。

  2. 试剂配置(在准备区进行,与扩增区分开,冰上操作

注:试剂使用前要完全解冻,使用前涡旋混匀,10000 rpm离心5 s,确保试剂完全离心至管底,否则会出现装量差异的现象。

若有N个待检测样本,则需配置N+2扩增反应(待检样本数N+1个阳性质控品+1个阴性质控品,按下表要求进行扩增反应液的配制,配制完成后充分震荡混匀,10000 rpm离心5 s。按每管20μL分装至0.2 ml PCR管中,并做好标记扩增反应液需现配现用。


N人份(μL)

PCR反应液

N+2×17

酶混合液

N+2×3

总量

N+2×20

  3. 加样在样品处理区进行,冰上操作

按阴性质控品、待测样品、阳性质控品的加样顺序,分别取5μL,加入至已分装扩增反应液的八联管中,反应总体系为25μL。盖紧管盖,短暂离心后置于荧光定量PCR仪中,并记录样本摆放顺序。

  4. 扩增反应(在扩增区进行

选择FAM通道检测H5亚型选择HEX通道检测N1亚型。按以下扩增程序表设置PCR扩增参数。

步骤

温度

时间

循环数

1

逆转录

50

10min

1

2

预变性

95

3min

1

3

变性

95

10sec

45cycle

4

退火延伸及荧光检测

55

30 sec

报告荧光:FAMHEX;淬灭荧光:NONE




企业愿景

    公司将一如既往的视诚信为最重要的文化精神;在经营决策和管理的全过程中信守“以产品质量、优质服务”为原则和“为人类健康服务”为宗旨的理念;融前沿科技、全球资源与优质人才为资本,以开拓创新、锐意进取、精益求精之精神,科学管理之导向,凝聚员工、客商之合力,同舟共济,为实现人类的食品安全和生物医药业的高速发展不懈奋斗!

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